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　　大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)說(shuō)明書(shū)

　　BS-2901大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒

　　一、產(chǎn)品概述

　　本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù)，專用于體外定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿等樣本中第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)的濃度。其核心原理為：預(yù)包被抗體的微孔板捕獲樣本中的FⅧAg，再通過(guò)酶標(biāo)記抗體形成復(fù)合物，經(jīng)底物顯色后，通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度(OD值)，濃度與顯色強(qiáng)度呈正相關(guān)?。該技術(shù)具有高靈敏度(檢測(cè)限低至0.008 IU/mL)和特異性，適用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床診斷?。

　　二、試劑盒組成

　　預(yù)包被微孔板?：96孔格式，含固定化捕獲抗體?。

　　校準(zhǔn)品?：標(biāo)準(zhǔn)濃度梯度(如80、40、20、10、5、2.5 U/L)，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　對(duì)照品?：陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照血漿，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性?。

　　酶標(biāo)記物?：辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體?。

　　底物溶液?：TMB顯色液，反應(yīng)后呈藍(lán)色，終止后轉(zhuǎn)黃色?。

　　終止液?：硫酸溶液，終止酶促反應(yīng)。

　　樣本稀釋液?：用于樣本預(yù)處理，避免高濃度樣本超出檢測(cè)范圍。

　　洗滌緩沖液?：濃縮液，需按比例稀釋使用?。

　　三、樣本處理與保存

　　血清/血漿?：離心分離(3000×g，10分鐘)，避免溶血或脂血;EDTA、肝素或檸檬酸鹽抗凝血漿均可使用。

　　組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清。

　　保存條件?：短期(2-8℃)或長(zhǎng)期(-70℃)保存，避免反復(fù)凍融;室溫解凍后充分混勻。

　　四、操作步驟

　　準(zhǔn)備試劑?：室溫平衡試劑20分鐘，洗滌緩沖液稀釋后使用?。

　　加樣?：每孔加入50μL樣本或校準(zhǔn)品，37℃孵育1小時(shí)。

　　洗滌?：棄液后，洗滌緩沖液清洗3次，每次3分鐘?。

　　加酶標(biāo)記物?：加入HRP標(biāo)記抗體，37℃孵育1小時(shí)?。

　　再次洗滌?：重復(fù)洗滌步驟?。

　　顯色?：加入TMB底物，37℃避光孵育10-30分鐘。

　　終止反應(yīng)?：加入終止液，溶液由藍(lán)轉(zhuǎn)黃?。

　　檢測(cè)?：酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。

　　五、注意事項(xiàng)

　　操作規(guī)范?：嚴(yán)格遵循孵育時(shí)間和溫度，避免交叉污染?。

　　樣本要求?：避免溶血或高脂樣本，稀釋后檢測(cè)超出范圍的樣本。

　　試劑保存?：2-8℃避光保存，有效期6個(gè)月;濃縮洗滌液需溶解后使用?。

　　儀器校準(zhǔn)?：使用高精度加樣器(0.5-1000μL)和450nm酶標(biāo)儀。

　　安全提示?：僅限科研用途，操作時(shí)佩戴防護(hù)裝備?。

　　六、性能驗(yàn)證

　　靈敏度?：檢測(cè)限低至0.008 IU/mL，可準(zhǔn)確識(shí)別低濃度樣本?。

　　精密度?：板內(nèi)變異系數(shù)<10%，板間變異系數(shù)<15%，確保結(jié)果重現(xiàn)性?。

　　線性范圍?：標(biāo)準(zhǔn)曲線覆蓋2.5-80 U/L，樣本稀釋后仍保持線性。

　　特異性?：與結(jié)構(gòu)類似物無(wú)交叉反應(yīng)，避免假陽(yáng)性?。

　　七、應(yīng)用范圍

　　本試劑盒適用于大鼠FⅧAg的定量分析，支持疾病機(jī)制研究、藥物開(kāi)發(fā)等科研場(chǎng)景，提供穩(wěn)定可靠的檢測(cè)數(shù)據(jù)。

　　注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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