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小鼠肉堿脂酰轉移酶(CPT)ELISA檢測試劑盒技術說明書
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  小鼠肉堿脂酰轉移酶(CPT)ELISA檢測試劑盒技術說明書

  BS-9438小鼠肉堿脂酰轉移酶(CPT)ELISA試劑盒

  一、產品概述

  本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理,專用于體外定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中肉堿脂酰轉移酶(CPT-1)的含量。CPT-1是線粒體內膜的關鍵酰基轉移酶,催化脂肪酸轉運過程,在能量代謝中起核心作用?。

  二、技術參數(shù)

  檢測范圍?:0.156-10 ng/mL(以CPT-1A亞型為例)?

  靈敏度?:低檢測限≤0.1 ng/mL

  特異性?:與小鼠CPT-1抗體特異性結合,無交叉反應

  重復性?:批內變異系數(shù)(CV)<10%,批間CV<15%

  有效期?:6個月(2-8℃避光保存)?

  三、試劑盒組成

  組分 48T規(guī)格 96T規(guī)格 保存條件

  預包被酶標板 8×6條 8×12條 4℃

  標準品 1支(凍干) 1支(凍干) -20℃

  生物素化檢測抗體 60 μL 120 μL -20℃

  顯色底物(TMB) 3 mL 6 mL 4℃避光

  終止液 6 mL 12 mL 室溫

  20×濃縮洗滌液 30 mL 60 mL 室溫

  四、樣本處理規(guī)范

  血清/血漿采集?:

  使用無熱原、無內毒素試管,避免溶血。

  3000×g離心10分鐘(血清)或30分鐘(血漿),取上清。

  短期保存(2-8℃≤48小時),長期需分裝-20℃/-80℃凍存,避免反復凍融?。

  組織勻漿制備?:

  稱取0.1g組織或500萬細胞,加入1mL裂解液。

  冰浴勻漿后,600×g離心5分鐘棄沉淀,上清液11000×g離心10分鐘取上清?。

  五、操作流程

  標準品稀釋?:

  取7支EP管,標注1/2至1/64梯度,每管加入200μL標準品稀釋液。

  首管加入200μL原液混勻,依次等比稀釋至1/64濃度?。

  酶標板操作?:

  每孔加入100μL標準品/樣本,37℃孵育90分鐘。

  洗滌3次后,加入100μL生物素化抗體,37℃孵育60分鐘。

  加入100μL辣根過氧化物酶(HRP)標記鏈霉親和素,37℃孵育30分鐘。

  顯色反應:每孔加入90μL TMB底物,避光孵育15分鐘,終止液終止反應。

  讀數(shù)分析?:

  酶標儀450nm波長測定OD值,繪制標準曲線計算樣本濃度。

  六、注意事項

  質量控制?:每批次實驗需設置空白孔、標準曲線孔及復孔。

  干擾因素?:避免使用高脂/溶血樣本,洗滌需以減少背景噪聲。

  安全防護?:終止液含liusuan,操作時佩戴防護裝備。

  七、應用領域

  基礎研究?:解析小鼠脂肪酸代謝機制。

  藥物開發(fā)?:評估代謝類藥物的療效。

  疾病模型?:研究肥胖、糖尿病等代謝性疾病?。

  本試劑盒僅供科研使用,不可用于臨床診斷。詳細操作請參閱隨附說明書。

  注:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒

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